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Peptide Calculator

样品制备计算器

将每个样品的体积乘以样品数量和加做的富余百分比,得到需要准备的总体积。供实验室与研究使用,不构成医疗或剂量建议。

实验室制备

计算器输入项

这是一个数学与实验室参考工具。它不进行诊断、治疗或剂量推荐,也不构成医疗建议。

样品配制计算器算出要配制多少物料,好让一组里的每个样品都能按同一个体积取用,其中还包括一个用来吸收移液损失的余量百分比。

这只是一次小计算,却省掉一个真实的麻烦:一轮做到最后少了三个样品,而且没有办法补上。

余量百分比是其中真正有实际意义的部分。低于大约百分之五就等于把自己暴露在风险里,而合适的数值取决于每个样品要经过多少次转移。

余量是需求量的一定百分比

这个计算是:每个样品的体积乘以样品数,再乘以一加余量分数,而那个「一加」就是整个想法的全部内容。百分之十的余量是 1.1 这个乘数,不是 10,也不是 1.01。算术最常在这里出错,因为一个以百分比报出的余量,很容易被当成一个因子而不是一个增量。五十毫升的百分之十是五毫升,五十加五是五十五,1.1 这个因子在底下做的就是这件事。

它是需求量的百分比,不是成品总量的百分比,而两种读法给出的答案看上去几乎一样。给五十的需求量加上百分之十,得到五十五。反过来解「成品体积的百分之十」,意味着要配制五十除以 0.9,也就是 55.56 毫升。第一种是正确读法,第二种是同一个意图算错了顺序,剩下的是 5.56 而不是 5 的余量。任何余量都是一个决定,所以值得有意识地做出来,而不是靠重新排列凑出来。

换一个规模再算一遍角度。每个 0.5 毫升、九十六个样品,光需求就是四十八毫升;百分之五的余量给出要配制 50.4 毫升,余下 2.4 毫升,不足五个样品的量。对一块板来说,这通常正是合适的量级,因为那里的风险是一次移液损失,而不是反复转移。还要注意输入只有毫升,所以微升规模的配制必须先换算再填入,而 体积单位换算器 就是做这一步的地方。

一个固定的百分比余量会算错什么

一个固定的百分比,是对一个其实与百分比无关的问题给出的粗糙答案。它吸收的是死体积:留在移液器吸头里的一层液膜、留在来源容器里的残留、吸头能吸住却打不出来的体积、留在孔里的那一滴。死体积是一个绝对量,对某个吸头来说大体固定,所以它所占的百分比会随着每样品体积的上升而下降。每样品 0.05 mL 的损失,对于一毫升的样品是百分之五,对于十毫升的样品是半个百分点,用的是同一支移液器和同一次同样马虎的转移。

损失还会随转移次数相乘。一个需要三次转移的样品,携带的损失大约是一个只需一次转移的三倍,所以所需体积按「样品体积乘以数量再乘以转移次数」增长。余量百分比真正想估的就是这个乘积,这也是为什么合适的余量取决于方法,而不是取决于样品数量。一个适合从储液直接转移的固定数值,用在一组配好的连续稀释样品上就会不够,而对于那里的转移结构本身,合适的工具是 连续稀释计算器 。

蒸发和温度漂移叠加在这两种效应之上,而这里完全没有建模。一组配好的样品敞开放在一个长时间的时段里会损失溶剂,损失掉的那部分体积会使其中每个样品的浓度上升同样的比例。这是否要紧,取决于样品所要进入的东西能容忍多少,而它在总量数字里完全看不见,这也正是它不再是算术问题、而变成操作问题的那个点。 取整与小体积指南 讲的是相关的问题:小体积的算术在多大范围内仍然可信。

把样品数数得实在一点

数量在敲进去的那一刻就定死了,所以先把该算什么理清楚才值得。对照、空白和整条校准曲线同样是样品,而它们恰恰是最常被漏掉的,因为它们不是被测的那个东西。标准曲线上的每一个点都需要按与未知样品相同的每样品体积单独配制,所以一条带复孔的六点曲线,在未知样品开始之前就已经多出十二个容器。当曲线的各档位是用同一份母液配制缩放到不同体积得到时, 批量放大计算器 就是那件事的算术,而每一个档位仍然需要自己的余量。

多算几个很便宜,不够却不是。一组样品在最后少一个的时候,它已经按所选的余量配好了,而且没法在不扰动已经分装出去那部分的前提下补上。数量还必须是整数,所以计划的样品数要在填进去之前而不是之后向上取整。如果有些样品可能会重做,现在就把这种可能性算进去,而不是把它当成日后的一个问题;还要记住输出的是一个体积,所以一个以毫升表示的余量必须再除以每样品体积,才能看出它到底相当于几个备用样品。

一个总体积不是一份配方

输出的是一个要配制的体积,而不是配制它的方法。要真的把它做出来,你需要这个体积对应的化合物质量和你想要的浓度,而那是另外一对计算。从固体出发,质量由浓度乘以体积得到,这就是 母液计算器 。从一份母液出发,母液体积由 C1V1 关系得到,稀释液体积则是余下的部分,而 C1V1 稀释计算器 一步就完成这个拆分。

母液体积和稀释液体积都确定之后,把它们合起来就是 溶液混合计算器 上的那个按体积加权的平均,而这是同一个推理反过来走:溶质总量由称出去的量固定,所以最终浓度由最终体积得到。如果同一份配制还要在另一个规模上另作他用,那么那个比值又是一次批量缩放的问题。而且这里加上的余量只是体积上的余量。本页没有任何内容会决定浓度、检查所需质量能否溶在这个体积里,或者确认确实存在一份浓度可用的母液可供稀释。

本计算器的工作原理

用每样品的体积乘以样品数,得到基础体积。再乘以一加余量分数,得到真正要配制的体积。

五十个样品加上百分之十的余量,会多出五个样品的量,足够吸收最后几个样品上的移液损失,而不会剩下很大的盈余。

公式

  • total volume = per sample volume x number of samples x (1 + overage/100)

    overage
    在严格需求量之外要额外配制的余量百分比

    整个要点就在那个「1 +」。百分之十的余量给出的是 1.1 这个因子,不是 10。

完整算例

为 50 个样品各配 1 mL,余量百分之十

仅为算例。所选数字是为了便于核对运算过程,并不代表剂量、方案或任何建议。

已知

每样品体积
1 mL
样品数量
50
余量
10%
  1. 基础体积
    代入
    1 mL x 50
    结果
    50 mL
  2. 加上余量
    代入
    50 mL x 1.10
    结果
    55 mL

这说明了什么

五十五毫升,也就是五个样品量的余量。没有余量的话,你手上正好是五十毫升,配五十个一毫升的样品,一点也不剩,第四十九个样品上一次移液损失就没有着落,而出错的总是这个地方。

理解各项输入

每样本体积 (mL)
每个样品所需的体积,以 mL 计。这是每个样品的量,不是总量。
样本数量
有多少个样品。对照和空白也要算进去,不只是未知样品。
备用余量 (%)
要额外加上的余量百分比。
注意: 想表达百分之十就填 10,得到的因子是 1.1,这是对的。填 0.1 则完全没有余量,因为这个字段要的是百分比。

理解各项输出

需制备总体积 (mL)
要配制的总体积,包含余量。

单位说明

Overage
在严格需求量之外多配的物料,用来吸收损失。它按需求量表示为百分比,而不是按最终体积。

常见错误

  • 把余量加在错误的基数上。它是需求量的百分比,所以 50 mL 的百分之十是 5 mL,得到 55,而不是 50 加上 55 的百分之十。
  • 忘记每次转移的移液损失会随样品数量和每样品转移次数相乘累积。
  • 使用已经把死体积算进去的每样品体积,这就算了两遍。

重要局限

  • 一个固定的余量假定每个样品的损失都一样,这是乐观的。损失通常集中在最后几个样品上。
  • 它不建模比重,也不建模蒸发,而这两者在长时间的配制过程中都有影响。

常见问题

What does the sample prep calculator compute?

It computes the total volume needed to prepare a given number of replicate samples of a fixed per-sample volume, with an optional overage percentage for pipetting dead volume or waste.

How do I use the sample prep calculator?

Enter the volume needed per sample, the number of samples you are preparing, and an optional extra percentage to account for pipetting loss. The calculator returns the total volume to prepare.

What is the formula behind the sample prep calculator?

Total volume = per-sample volume x number of samples x (1 + extra percent / 100).

Why include an overage percentage on the sample prep calculator?

Real pipetting always leaves some dead volume in tips and tubes, so preparing exactly the sum of per-sample volumes with no overage often leaves you short for the last sample or two; a small buffer percentage avoids that.

What happens if I leave the overage field blank on the sample prep calculator?

It defaults to 0 percent overage, giving you the exact sum with no buffer, if that is what you intend.

What units does the sample prep calculator use?

Volume in mL for both the per-sample input and the total volume result.

Does the number of samples have to be a whole number on the sample prep calculator?

Yes, the sample count must be a positive whole number; a fractional or zero sample count is rejected as invalid.

Is the sample prep calculator free?

Yes. The sample prep calculator runs entirely client side.