Calculateur de preparation d'echantillons

Le calcul est le volume par échantillon multiplié par le nombre d’échantillons, multiplié par un plus la fraction de marge supplémentaire, et ce un plus est tout le contenu de l’idée. Une marge de dix pour cent est un multiplicateur de 1.1, et non de 10 ni de 1.01. C’est là que l’arithmétique glisse le plus souvent, parce qu’une marge exprimée en pourcentage invite à la lire comme un facteur plutôt que comme un incrément. Dix pour cent de cinquante millilitres font cinq millilitres, et cinquante plus cinq font cinquante-cinq, et c’est exactement ce que le facteur de 1.1 fait en dessous.

C’est un pourcentage du besoin et non du total fini, et les deux donnent des réponses qui paraissent presque identiques. Dix pour cent ajoutés à un besoin de cinquante donnent cinquante-cinq. Dix pour cent du volume fini, résolus à l’envers, signifient préparer cinquante divisé par 0.9, ce qui fait 55.56 millilitres. La première lecture est la bonne, et la seconde est la même intention calculée dans le désordre, laissant un surplus de 5.56 plutôt que de 5. Tout surplus est une décision, et il vaut mieux le décider délibérément qu’y arriver par réarrangement.

Un second angle chiffré à une autre échelle. Un demi-millilitre chacun sur quatre-vingt-seize échantillons donne un besoin nu de quarante-huit millilitres, et une marge de cinq pour cent donne 50.4 millilitres à préparer, soit un surplus de 2.4 millilitres et donc moins de cinq échantillons. C’est généralement le bon ordre de grandeur pour une plaque où le risque est une perte de pipetage isolée plutôt qu’un transfert répété. Remarquez aussi que les entrées sont uniquement en millilitres, si bien qu’une préparation à l’échelle du microlitre doit être convertie avant d’être saisie, et le convertisseur d’unités de volume est l’endroit où le faire.

Un pourcentage fixe est une réponse approximative à une question qui ne porte pas vraiment sur les pourcentages. Ce qu’il absorbe, c’est le volume mort : le film laissé dans une pointe de pipette, le résidu dans le récipient source, le volume qu’une pointe contient mais ne peut pas délivrer, la goutte qui reste dans le puits. Le volume mort est une grandeur absolue, à peu près fixe pour une pointe donnée, si bien que le pourcentage qu’il représente baisse quand le volume par échantillon monte. Une perte de 0.05 mL par échantillon fait cinq pour cent d’un échantillon d’un millilitre et un demi-pour cent d’un échantillon de dix millilitres, avec la même pipette et le même transfert imprudent.

La perte se multiplie aussi avec le nombre de transferts. Un échantillon qui demande trois transferts porte environ trois fois la perte d’un échantillon qui n’en demande qu’un, si bien que le volume nécessaire croît comme le volume par échantillon multiplié par le nombre multiplié par les transferts. Ce produit est ce que le pourcentage de marge supplémentaire essaie réellement d’estimer, et c’est pourquoi la bonne marge dépend de la méthode plutôt que du nombre d’échantillons. Un chiffre fixe qui convient à un transfert direct depuis un réservoir sera insuffisant pour un jeu en série préparé, pour lequel le calculateur de dilution en série est l’outil pertinent pour la structure des transferts elle-même.

L’évaporation et la dérive de température se superposent à ces deux effets et ne sont pas du tout modélisées ici. Un jeu préparé laissé ouvert pendant une longue séance perd du solvant, ce qui augmente la concentration de chaque échantillon qu’il contient de la fraction de volume qui s’est évaporée. Que cela compte ou non dépend de la tolérance de ce à quoi les échantillons servent, et c’est totalement invisible dans un chiffre de volume total, ce qui est le moment où cela cesse d’être un problème d’arithmétique pour devenir un problème de manipulation. Le guide sur l’arrondi et les petits volumes traite la question voisine de savoir jusqu’où l’arithmétique des petits volumes reste fiable.

Le compte est fixé dès qu’on le tape, et il vaut donc la peine de décider d’abord ce qui compte. Les témoins, les blancs et la courbe d’étalonnage entière sont des échantillons eux aussi, et ce sont ceux qu’on oublie le plus souvent parce qu’ils ne sont pas la chose mesurée. Chaque point d’une courbe d’étalonnage a besoin de sa propre préparation au même volume par échantillon que les inconnus, si bien qu’une courbe à six points avec doublons a déjà ajouté une douzaine de récipient avant même que les inconnus commencent. Lorsque les niveaux de la courbe sont obtenus en mettant une préparation mère à l’échelle vers différents volumes, le calculateur de mise à l’échelle de lot est l’arithmétique correspondante, et chaque niveau a toujours besoin de sa propre marge supplémentaire.

Compter quelques échantillons de trop ne coûte rien, et se trouver à court n’est pas gratuit. Un jeu qui se termine avec un échantillon de moins a déjà été fabriqué avec la marge choisie, et on ne peut pas le compléter sans perturber ce qui a déjà été dispensé. Le compte doit aussi être un nombre entier, si bien qu’un nombre d’échantillons prévu est arrondi à l’entier supérieur avant d’être saisi et non après. Si certains échantillons sont susceptibles d’être répétés, comptez cette possibilité maintenant au lieu d’en faire un problème ultérieur, et souvenez-vous que ce qui sort est un volume : un surplus exprimé en millilitres doit donc être redivisé par le volume par échantillon pour voir à combien d’échantillons de réserve il correspond réellement.

Ce qui sort est un volume à préparer, et non une méthode pour le préparer. Pour le fabriquer réellement, il vous faut la masse de composé à laquelle ce volume correspond et la concentration que vous voulez, et ce sont là deux autres calculs. En partant d’un solide, la masse découle de la concentration multipliée par le volume, ce qui est le calculateur de solution mère . En partant d’une solution mère, le volume de solution mère découle de la relation C1V1, le volume de diluant étant le reste, et le calculateur de dilution C1V1 fait cette répartition en une étape.

Une fois le volume de solution mère et le volume de diluant connus, les combiner est la moyenne pondérée par les volumes du calculateur de mélange de solutions , ce qui est le même raisonnement à l’envers : la quantité totale de soluté est fixée par ce qui a été pesé, si bien que la concentration finale découle du volume final. Si une préparation doit servir un second usage à une autre taille, ce rapport est à nouveau un problème de mise à l’échelle de lot. Et la marge ajoutée ici ne porte que sur le volume. Rien sur cette page ne décide de la concentration, ne vérifie que la masse requise se dissoudra dans ce volume, ni ne confirme qu’une solution mère à une concentration utilisable existe pour être diluée au départ.