Calcolatore di preparazione dei campioni
Moltiplica il volume per campione per il numero di repliche e una percentuale di eccedenza per dare il volume totale da preparare. Per uso di laboratorio e ricerca; non un consiglio medico o di dosaggio.
Preparazione di laboratorio
Campi del calcolatore
Questo e uno strumento di riferimento matematico e di laboratorio. Non diagnostica, non tratta e non raccomanda una dose, e non costituisce un consiglio medico.
Il calcolatore della preparazione dei campioni calcola quanto materiale preparare perché ogni campione di un insieme possa essere prelevato allo stesso volume, incluso un margine percentuale per assorbire le perdite da pipettaggio.
È un calcolo piccolo che risolve un problema reale: trovarsi con tre campioni in meno alla fine di una sessione, senza modo di rifarli.
La percentuale di eccedenza è la parte pratica. Qualsiasi valore sotto il cinque per cento circa ti lascia scoperto, e il valore giusto dipende da quanti trasferimenti richiede ciascun campione.
L’eccedenza è una percentuale del requisito
Il calcolo è volume per campione moltiplicato per numero di campioni, moltiplicato per uno più la frazione di eccedenza, e quel uno più è tutto il contenuto dell’idea. Un’eccedenza del dieci per cento è un moltiplicatore di 1.1, non di 10 e non di 1.01. È qui che l’aritmetica scivola più spesso, perché un’eccedenza citata come percentuale invita a essere letta come un fattore anziché come un incremento. Il dieci per cento di cinquanta millilitri è cinque millilitri, e cinquanta più cinque fa cinquantacinque, ed è quello che il fattore 1.1 sta facendo sotto.
È una percentuale del requisito e non del totale finale, e i due producono risposte che sembrano quasi identiche. Dieci per cento aggiunti a un requisito di cinquanta danno cinquantacinque. Il dieci per cento del volume finale, risolto a ritroso, significa preparare cinquanta diviso 0.9, che è 55.56 millilitri. Il primo è la lettura corretta e il secondo è la stessa intenzione calcolata nell’ordine sbagliato, lasciando un surplus di 5.56 anziché di 5. Qualunque surplus è una decisione, quindi vale la pena prenderlo deliberatamente invece di arrivarci per riordino.
Un secondo esempio svolto a una scala diversa. Mezzo millilitro ciascuno su novantasei campioni è un requisito nudo di quarantotto millilitri, e un’eccedenza del cinque per cento dà 50.4 millilitri da preparare, un surplus di 2.4 millilitri e quindi meno di cinque campioni. Di solito è l’ordine di grandezza giusto per una piastra in cui il rischio è una singola perdita da pipettaggio e non un trasferimento ripetuto. Nota anche che gli ingressi sono solo in millilitri, quindi una preparazione su scala in microlitri va convertita prima di essere inserita, e il convertitore delle unità di volume è il posto in cui farlo.
Che cosa sbaglia un’eccedenza a percentuale fissa
Una percentuale fissa è una risposta grossolana a una domanda che non riguarda davvero le percentuali. Ciò che assorbe è il volume morto: il film che resta sul puntale di una pipetta, il residuo nel recipiente di partenza, il volume che il puntale contiene ma non può erogare, la goccia che resta nel pozzetto. Il volume morto è una grandezza assoluta, grossomodo fissa per un dato puntale, quindi la percentuale che rappresenta scende all’aumentare del volume per campione. Una perdita di 0.05 mL per campione è il cinque per cento di un campione da un millilitro e mezzo per cento di un campione da dieci millilitri, con la stessa pipetta e lo stesso trasferimento negligente.
La perdita si moltiplica anche con il numero di trasferimenti. Un campione che richiede tre trasferimenti porta grossomodo tre volte la perdita di uno che ne richiede uno solo, quindi il volume necessario cresce come volume per campione moltiplicato numero di campioni moltiplicato numero di trasferimenti. Quel prodotto è ciò che la percentuale di eccedenza sta davvero cercando di stimare, ed è il motivo per cui l’eccedenza giusta dipende dal metodo e non dal numero di campioni. Una cifra fissa adatta a un trasferimento diretto da un serbatoio verrà corta per una serie seriale preparata, per la quale il calcolatore delle diluizioni seriali è lo strumento pertinente per la struttura dei trasferimenti stessi.
Evaporazione e deriva termica si aggiungono a entrambi gli effetti e non sono modellate qui per nulla. Una serie preparata lasciata aperta durante una sessione lunga perde solvente, il che alza la concentrazione di ogni campione in essa della frazione di volume che è andata via. Se ciò conti dipende dalla tolleranza di ciò a cui i campioni alimentano, ed è interamente invisibile in un volume totale, che è il punto in cui smette di essere un problema aritmetico e diventa un problema di gestione. La guida all’arrotondamento e ai piccoli volumi copre la domanda collegata di fin dove l’aritmetica dei piccoli volumi resti affidabile.
Contare i campioni con onestà
Il numero è fissato nel momento in cui lo digiti, quindi vale la pena decidere anzitutto che cosa si conta. Controlli, bianchi e l’intera curva di calibrazione sono campioni anch’essi, e sono quelli più spesso tralasciati perché non sono la cosa che si sta misurando. Ogni punto di una curva standard richiede la propria preparazione allo stesso volume per campione degli ignoti, quindi una curva a sei punti con duplicati ha già aggiunto dodici recipienti prima che comincino gli ignoti. Dove i livelli della curva vengono prodotti ridimensionando una sola preparazione madre a volumi diversi, il calcolatore del dimensionamento di lotti è l’aritmetica che serve, e ogni livello richiede comunque una propria eccedenza.
Contare qualche campione in più costa poco e restare in corto no. Una serie che finisce con un campione di meno è già stata fatta con l’eccedenza scelta e non può essere integrata senza disturbare ciò che è già stato erogato. Il numero deve anche essere intero, quindi un numero di campioni pianificato viene arrotondato per eccesso prima di essere inserito e non dopo. Se è probabile che alcuni campioni vadano ripetuti, conta quella possibilità adesso invece di trattarla come un problema successivo, e ricorda che ciò che ne esce è un volume, quindi un surplus espresso in millilitri va diviso per il volume per campione per vedere quanti campioni di scorta rappresenti davvero.
Un volume totale non è una procedura
Ciò che esce è un volume da preparare, non un metodo per prepararlo. Per prepararlo davvero ti servono la massa di composto a cui quel volume corrisponde e la concentrazione che vuoi, e sono un’altra coppia di calcoli. Partendo da un solido, la massa segue dalla concentrazione moltiplicata per il volume, ed è il calcolatore della soluzione madre . Partendo da una soluzione madre, il volume di soluzione madre segue dalla relazione C1V1 con il volume di diluente come resto, e il calcolatore di diluizione C1V1 esegue quella divisione in un solo passo.
Una volta noti il volume di soluzione madre e il volume di diluente, combinarli è la media pesata per volume del calcolatore di miscelazione delle soluzioni , che è lo stesso ragionamento eseguito al contrario: la quantità totale di soluto è fissata da ciò che è stato pesato, quindi la concentrazione finale segue dal volume finale. Se una preparazione deve servire a una seconda finalità a una dimensione diversa, quel rapporto è di nuovo un problema di dimensionamento di lotti. E l’eccedenza aggiunta qui è un margine sul solo volume. Nulla su questa pagina decide la concentrazione, verifica che la massa richiesta si dissolva in quel volume, o conferma che esista una soluzione madre a una concentrazione lavorabile da diluire in primo luogo.
Come funziona questo calcolatore
Moltiplica il volume per campione per il numero di campioni per ottenere il volume di base. Poi moltiplica per uno più la frazione di eccedenza per ottenere il volume da preparare effettivamente.
Un’eccedenza del dieci per cento su cinquanta campioni dà cinque campioni in più di scorta, che bastano ad assorbire la perdita da pipettaggio sugli ultimi senza lasciare un surplus grande.
Le formule
-
total volume = per sample volume x number of samples x (1 + overage/100)
- overage
- la percentuale di eccedenza da preparare oltre il requisito rigoroso
L’1 + è tutto il punto. Un’eccedenza di 10 dà un fattore di 1.1, non di 10.
Esempio risolto
Preparare 1 mL ciascuno per 50 campioni con il 10 per cento di eccedenza
Esempio illustrativo. I numeri sono scelti per rendere l aritmetica facile da verificare. Non sono una dose, un protocollo o una raccomandazione.
Dati
- Volume per campione
- 1 mL
- Numero di campioni
- 50
- Eccedenza
- 10%
- Volume di base
- Sostituzione
- 1 mL x 50
- Risultato
- 50 mL
- Aggiungi l’eccedenza
- Sostituzione
- 50 mL x 1.10
- Risultato
- 55 mL
Cosa dimostra
Cinquantacinque millilitri, che sono un surplus di cinque campioni. Senza l’eccedenza avresti esattamente cinquanta millilitri per cinquanta campioni da un millilitro, con nulla da mettere da parte per una perdita da pipettaggio sul campione quarantanove, che è dove va sempre storto.
Capire i valori inseriti
- Volume per campione (mL)
- Il volume che ogni campione richiede, in mL. È per campione, non il totale.
- Numero di campioni
- Quanti campioni. Contando controlli e bianchi, non solo gli ignoti.
- Eccedenza (%)
- La percentuale di eccedenza da aggiungere sopra.
- Attenzione: Inserire 10 quando intendi il dieci per cento dà un fattore di 1.1, che è corretto. Inserire 0.1 non darebbe alcuna eccedenza, perché il campo si aspetta una percentuale.
Capire i risultati
- Volume totale da preparare (mL)
- Il volume totale da preparare, inclusa l’eccedenza.
Unita spiegate
- Overage
- Materiale preparato oltre il requisito rigoroso, per assorbire le perdite. Espresso come percentuale del requisito e non del volume finale.
Errori comuni
- Applicare l’eccedenza alla base sbagliata. È una percentuale del requisito, quindi il 10 per cento di 50 mL è 5 mL, che dà 55, e non 50 più il 10 per cento di 55.
- Dimenticare che la perdita da pipettaggio per trasferimento si compone sul numero di campioni e sul numero di trasferimenti per campione.
- Usare un volume per campione che include già un volume morto, il che lo conta due volte.
Limitazioni importanti
- Un’eccedenza fissa presuppone la stessa perdita per ogni campione, ed è ottimistico. Le perdite si concentrano di solito negli ultimi campioni.
- Non modella il peso specifico né l’evaporazione, entrambi importanti per sessioni di preparazione lunghe.
Domande frequenti
What does the sample prep calculator compute?
It computes the total volume needed to prepare a given number of replicate samples of a fixed per-sample volume, with an optional overage percentage for pipetting dead volume or waste.
How do I use the sample prep calculator?
Enter the volume needed per sample, the number of samples you are preparing, and an optional extra percentage to account for pipetting loss. The calculator returns the total volume to prepare.
What is the formula behind the sample prep calculator?
Total volume = per-sample volume x number of samples x (1 + extra percent / 100).
Why include an overage percentage on the sample prep calculator?
Real pipetting always leaves some dead volume in tips and tubes, so preparing exactly the sum of per-sample volumes with no overage often leaves you short for the last sample or two; a small buffer percentage avoids that.
What happens if I leave the overage field blank on the sample prep calculator?
It defaults to 0 percent overage, giving you the exact sum with no buffer, if that is what you intend.
What units does the sample prep calculator use?
Volume in mL for both the per-sample input and the total volume result.
Does the number of samples have to be a whole number on the sample prep calculator?
Yes, the sample count must be a positive whole number; a fractional or zero sample count is rejected as invalid.
Is the sample prep calculator free?
Yes. The sample prep calculator runs entirely client side.
Calcolatrici correlate
- Calcolatore di miscelazione delle soluzioni Combina più soluzioni di volume e concentrazione noti in un volume totale, una massa totale e la concentrazione risultante. Per uso di laboratorio e ricerca; non un consiglio medico o di dosaggio.
- Calcolatore della percentuale di recupero Divide la quantità recuperata per la quantità attesa e moltiplica per 100 per dare la percentuale di recupero. Per uso di laboratorio e ricerca; non un consiglio medico o di dosaggio.
- Calcolatore della percentuale di resa Divide la resa effettiva per la resa teorica massima e moltiplica per 100 per dare la percentuale di resa. Per uso di laboratorio e ricerca; non un consiglio medico o di dosaggio.
- Calcolatore di correzione della purezza Moltiplica una massa lorda per la sua percentuale di purezza dichiarata per dare la massa effettiva di sostanza attiva. Per uso di laboratorio e ricerca; non un consiglio medico o di dosaggio.