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Peptide Calculator

Calculateur de dilution en serie

Applique un facteur de dilution fixe sur N étapes, concentration(i) = initiale / facteur^i, et indique le diluant par transfert. Pour un usage de laboratoire et de recherche; pas un conseil médical ou de dosage.

Concentration et dilution

Champs du calculateur

Il s'agit d'un outil de reference mathematique et de laboratoire. Il ne diagnostique pas, ne traite pas et ne recommande pas de dose, et ne constitue pas un conseil medical.

Foire aux questions

What does the serial dilution calculator compute?

It generates a step-by-step table of concentrations produced by repeatedly diluting a solution by a fixed factor, where the concentration at step i equals the initial concentration divided by the dilution factor raised to the power i.

How do I use the serial dilution calculator?

Enter the initial concentration, the dilution factor per step, for example 2 for a two-fold serial dilution, the number of steps, and the transfer volume used at each step. The calculator lists the concentration reached at every step.

What is a serial dilution used for?

It is a standard laboratory technique for producing a range of concentrations spanning several orders of magnitude from one starting solution, commonly used for standard curves, titrations, and assay range-finding.

What does the diluent-per-step result mean on the serial dilution calculator?

Assuming an equal transfer and diluent volume ratio to achieve the chosen factor, the calculator reports how much diluent to add at each step: diluent equals transfer volume times (dilution factor minus 1).

What dilution factors and step counts does the serial dilution calculator accept?

The dilution factor must be greater than 1, a factor of 1 or less would not dilute anything, and the number of steps must be a positive whole number no greater than 50.

How is the serial dilution calculator different from the dilution factor calculator?

The dilution factor calculator computes a single fold-change between two known concentrations after the fact; this calculator instead projects forward what concentration you will reach after N repeated dilution steps at a factor you choose.

What if I want an uneven dilution factor at each step of a serial dilution?

This calculator assumes the same fixed factor at every step; for a schedule with different factors at different steps, you would need to run the calculation manually or step through with the C1V1 dilution calculator repeatedly.

Is the serial dilution calculator free to use?

Yes. The serial dilution calculator runs entirely in your browser.

Une dilution en série est une chaîne d’étapes, chacune diluant le résultat de la précédente. Le calculateur de dilution en série affiche la concentration à chaque étape d’une telle chaîne, ainsi que le volume de transfert et le volume de diluant à chaque étape.

C’est la façon standard de construire une série de dilutions logarithmiques pour un dosage, et la série de concentrations qu’il renvoie est géométrique : chaque étape est la précédente divisée par le facteur de dilution.

L’arithmétique est la plus facile de tous les calculateurs d’ici. La comptabilité ne l’est pas, et c’est pourquoi un tableau vaut mieux que de la faire sur papier.

Une série géométrique est une droite sur un axe logarithmique

Une série au dixième se lit 10, 1, 0.1, 0.01 dans l’ordre, ce qui donne l’impression qu’elle décroît de plus en plus vite alors qu’elle décroît à vitesse constante. Le rapport entre termes successifs ne change jamais, et c’est ce rapport fixe qui définit une série de dilutions. Reportée sur le numéro d’étape plutôt que sur la valeur, la même série est une droite, et c’est cette propriété qui fait d’une série l’outil adapté pour couvrir plusieurs ordres de grandeur à partir de quelques préparations, au lieu d’essayer d’atteindre directement chaque niveau.

Pour la planification, la conséquence utile est que le nombre d’étapes est une plage et non une cible. Cinq étapes au dixième couvrent cinq décades, donc une série partant de 1 mg/mL se termine à 0.00001 mg/mL et ne peut pas séparer deux échantillons qui diffèrent de moins d’un facteur dix. Diviser le facteur par deux achète une résolution plus fine sur la même plage au prix d’étapes supplémentaires : dix étapes de facteur deux à partir de 1 mg/mL atteignent une part sur 1024, soit 0.000977 mg/mL. Le guide de planification des dilutions en série présente le même choix du point de vue de la planification.

Le volume de transfert fixe la taille d’une étape, pas son rapport

Le facteur est fixé par le rapport entre le volume de transfert et le volume total de l’étape, et le volume de transfert ne fixe que l’échelle à laquelle ce rapport est mesuré. Avec un facteur dix et un prélèvement de 1 mL, chaque étape se fait en ajoutant 9 mL de diluant pour atteindre un total de 10 mL, si bien que le diluant par étape est le volume de transfert multiplié par le facteur moins un. Portez le prélèvement à 0.5 mL et le diluant devient 4.5 mL, le total devient 5 mL, et le facteur est toujours exactement dix. Rien dans la série de concentrations ne change du tout.

Cette indépendance est ce qui fait du choix du prélèvement une question pratique plutôt que mathématique, et la contrainte pratique est la pipette. Un prélèvement petit devant le volume nominal de l’instrument est dominé par sa propre erreur plutôt que par le facteur voulu, si bien qu’une série bâtie sur un prélèvement trop petit a un facteur qui n’est que nominativement dix. Un volume plus grand n’est pas automatiquement meilleur : un prélèvement plus grand consomme plus de diluant à chaque étape, et les deux effets doivent être mis en balance l’un avec l’autre. Le guide sur l’arrondi dans les petits volumes couvre le versant erreur de ce compromis.

Chaque étape hérite du mélange de la précédente

La série n’est géométrique que si chaque étape est homogène avant qu’on n’en prélève pour la suivante. Une solution qu’on a agitée mais pas vraiment mélangée n’a pas de concentration unique, et un prélèvement y prend un échantillon de concentration inconnue, ce qui transforme une série systématique en série aléatoire sans que rien dans le résultat ne le montre. Le calculateur ne peut pas détecter cela, et aucune étape ultérieure non plus, parce qu’une erreur à l’étape deux devient simplement la concentration de départ de l’étape trois. Rien plus bas dans la chaîne ne peut la rattraper, et c’est pourquoi le mélange entre les étapes mérite plus d’attention que le prélèvement que le tableau enregistre.

Les volumes ici sont traités comme exacts, et c’est la seconde idéalisation. Les prélèvements réels portent quelques pour cent d’erreur, et parce que les étapes sont enchaînées ces erreurs s’additionnent au lieu de se moyenner : après cinq étapes à erreurs indépendantes proches d’un pour cent, la concentration finie est fausse d’environ cinq pour cent. Rien de tout cela ne se répare par un recalcul, et c’est pourquoi l’habitude utile consiste à vérifier le haut de la série contre quelque chose de connu avant de faire confiance à son bas. Le calculateur de facteur de dilution est un moyen rapide de confirmer une étape quelconque de la chaîne prise isolément.

Quand une seule dilution ferait le même travail

Une chaîne d’étapes n’est pas automatiquement l’outil adapté, et il vaut la peine de demander quel problème est réellement résolu. Si une seule concentration est recherchée, une seule dilution est exacte, plus rapide et plus facile à auditer, parce qu’un facteur unique contient un rapport unique plutôt que plusieurs. Le calculateur de dilution général fait cela en une ligne. Une chaîne mérite sa place lorsqu’on veut une plage de concentrations à partir d’une seule matière de départ, ou lorsque la concentration finale est assez faible pour que l’atteindre directement demanderait un prélèvement trop petit à mesurer avec précision.

Lorsque c’est la chaîne qu’il faut, la sortie utile est le tableau entier plutôt que la dernière ligne, parce que les étapes intermédiaires sont des préparations utilisables en elles-mêmes. Une solution de travail préparée à une étape puis diluée à nouveau est un calcul distinct avec ses propres arrondis, et le calculateur de solution de travail est la page pour cette étape. Il vaut aussi la peine de se rappeler que cette page planifie une série au lieu d’en décrire une déjà faite : savoir si les concentrations tombent dans la plage que quelque chose peut réellement mesurer est une question de méthode de mesure et non d’arithmétique.

Comment fonctionne cette calculatrice

À chaque étape la concentration est divisée par le facteur. Si le facteur est dix, la série est 10, 1, 0.1, 0.01, soit une décade descendante à chaque étape.

À chaque étape, vous prélevez un volume de transfert de la solution précédente et ajoutez du diluant pour amener le total à un volume fixé. Le volume de transfert fixe le volume de l’étape, et le diluant est la différence. Seule la première étape utilise un volume de diluant différent, parce que la première étape part de la solution mère non diluée.

Les formules

  • concentration at step i = initial concentration / factor^i

    i
    le numéro d’étape, commençant à 0 pour la solution mère non diluée

    Une série géométrique. Chaque étape multiplie par le même facteur, si bien qu’une série au dixième couvre une décade par étape.

  • diluent volume at step i = total step volume - transfer volume

    La même chose à chaque étape sauf la première.

Exemple resolu

Une série au dixième en cinq étapes à partir de 1 mg/mL

Exemple illustratif. Les nombres sont choisis pour que l arithmetique soit facile a verifier. Ce n est ni une dose, ni un protocole, ni une recommandation.

Donnees

Concentration de départ
1 mg/mL
Facteur de dilution
10
Nombre d’étapes
5
Volume de transfert
1 mL
  1. Étape 1
    Substitution
    1 / 10
    Resultat
    0.1 mg/mL
  2. Étape 2
    Substitution
    0.1 / 10
    Resultat
    0.01 mg/mL
  3. Étape 3
    Substitution
    0.01 / 10
    Resultat
    0.001 mg/mL
  4. Étape 4
    Substitution
    0.001 / 10
    Resultat
    0.0001 mg/mL
  5. Étape 5
    Substitution
    0.0001 / 10
    Resultat
    0.00001 mg/mL

Ce que cela montre

Cinq décades de dilution, qui se termine à 0.00001 mg/mL. Une série au dixième est efficace en plage mais grossière en résolution, si bien qu’un dosage conçu autour d’elle ne peut distinguer que des échantillons qui diffèrent d’un facteur dix. Diviser le facteur par deux double le nombre d’étapes pour la même plage.

Comprendre les entrees

Concentration initiale
La concentration de la solution mère non diluée d’où la série part.
Facteur de dilution par etape
Le facteur de dilution appliqué à chaque étape.
Attention: Un facteur de 2 est une dilution au demi et divise la concentration par deux ; un facteur de 10 divise par dix. Écrire 2 là où vous entendez 1:2 est une erreur de facteur deux dans l’autre sens.
Nombre d'etapes de dilution
Combien d’étapes de dilution à effectuer.
Volume de transfert (mL)
Le volume reporté de chaque étape à la suivante.
Attention: Un volume de transfert si petit que l’erreur de pipetage domine rend toute la série peu fiable. Les pipettes sont le plus exactes entre un dixième et la moitié de leur volume nominal.

Comprendre les resultats

steps
Une ligne par étape, indiquant le numéro d’étape, la concentration obtenue, le volume de transfert reporté et le volume de diluant ajouté.

Unites expliquees

Serial dilution
Une chaîne de dilutions, chacune appliquée à la précédente.
Dilution factor
Le facteur par lequel chaque étape réduit la concentration. Un facteur de 10 est une dilution au dixième.
Decade
Une plage d’un facteur dix. Une série au dixième couvre une décade par étape.

Erreurs courantes

  • Confondre un facteur de 2 avec une dilution au demi. C’est la même chose, mais il est facile d’écrire l’un à la place de l’autre.
  • Choisir un volume de transfert inférieur à la plage d’exactitude de la pipette employée, de sorte que l’étape est dominée par l’erreur de pipetage plutôt que par le facteur voulu.
  • Ne pas mélanger entre les étapes. Une dilution en série n’est géométrique que si chaque étape est soigneusement mélangée avant le prélèvement.
  • S’arrêter trop tôt. Une série au dixième partant de 1 mg/mL demande onze étapes pour descendre sous 1 ng/mL.

Limitations importantes

  • Le volume de transfert est traité comme exact. Un pipetage réel porte quelques pour cent d’erreur, et dans une longue série ces erreurs se composent.
  • Le modèle suppose un mélange parfait et aucun report d’une étape à l’autre.
  • Il planifie la série. Il ne sait pas si les concentrations sont dans la plage que votre dosage peut mesurer.