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Peptide Calculator

Rechner fuer serielle Verduennung

Wendet einen festen Verdünnungsfaktor über N Schritte an, Konzentration(i) = Anfang / Faktor^i, und zeigt das Verdünnungsmittel je Transfer. Für Labor- und Forschungszwecke; keine medizinische Beratung oder Dosierungsempfehlung.

Konzentration und Verduennung

Eingaben des Rechners

Dies ist ein mathematisches und Labor-Referenzwerkzeug. Es stellt keine Diagnose, keine Behandlung und keine Dosierungsempfehlung dar und ist keine medizinische Beratung.

Haeufig gestellte Fragen

What does the serial dilution calculator compute?

It generates a step-by-step table of concentrations produced by repeatedly diluting a solution by a fixed factor, where the concentration at step i equals the initial concentration divided by the dilution factor raised to the power i.

How do I use the serial dilution calculator?

Enter the initial concentration, the dilution factor per step, for example 2 for a two-fold serial dilution, the number of steps, and the transfer volume used at each step. The calculator lists the concentration reached at every step.

What is a serial dilution used for?

It is a standard laboratory technique for producing a range of concentrations spanning several orders of magnitude from one starting solution, commonly used for standard curves, titrations, and assay range-finding.

What does the diluent-per-step result mean on the serial dilution calculator?

Assuming an equal transfer and diluent volume ratio to achieve the chosen factor, the calculator reports how much diluent to add at each step: diluent equals transfer volume times (dilution factor minus 1).

What dilution factors and step counts does the serial dilution calculator accept?

The dilution factor must be greater than 1, a factor of 1 or less would not dilute anything, and the number of steps must be a positive whole number no greater than 50.

How is the serial dilution calculator different from the dilution factor calculator?

The dilution factor calculator computes a single fold-change between two known concentrations after the fact; this calculator instead projects forward what concentration you will reach after N repeated dilution steps at a factor you choose.

What if I want an uneven dilution factor at each step of a serial dilution?

This calculator assumes the same fixed factor at every step; for a schedule with different factors at different steps, you would need to run the calculation manually or step through with the C1V1 dilution calculator repeatedly.

Is the serial dilution calculator free to use?

Yes. The serial dilution calculator runs entirely in your browser.

Eine serielle Verdünnung ist eine Kette von Schritten, von denen jeder die Ausgabe des vorherigen verdünnt. Der Rechner für serielle Verdünnungen stellt die Konzentration in jedem Schritt einer solchen Kette aus, zusammen mit dem Transfervolumen und dem Volumen des Verdünnungsmittels in jedem Schritt.

Das ist die Standardmethode, eine logarithmische Verdünnungsreihe für einen Assay aufzubauen, und die Konzentrationsreihe, die er zurückgibt, ist geometrisch: Jeder Schritt ist der vorherige geteilt durch den Verdünnungsfaktor.

Die Rechnung ist die einfachste jedes Rechners hier. Das Mitführen der Werte ist es nicht, weshalb es sich lohnt, eine Tabelle zu haben, statt es auf Papier zu rechnen.

Eine geometrische Reihe ist eine Gerade auf einer logarithmischen Achse

Eine Zehnerreihe liest sich der Reihe nach als 10, 1, 0.1, 0.01, was so aussieht, als fiele sie immer schneller, während sie in Wahrheit mit konstanter Rate fällt. Das Verhältnis zwischen aufeinanderfolgenden Gliedern ändert sich nie, und dieses feste Verhältnis ist das, was eine Verdünnungsreihe ausmacht. Trägt man sie gegen die Schrittnummer und nicht gegen den Wert auf, ist dieselbe Reihe eine Gerade, und das ist die Eigenschaft, die eine Reihe zum richtigen Werkzeug macht, um mehrere Größenordnungen aus einer Handvoll von Zubereitungen abzudecken, statt jede Stufe direkt anpeilen zu wollen.

Für die Planung ist die nützliche Folge, dass die Anzahl der Schritte ein Bereich ist und kein Ziel. Fünf Zehnerschritte überspannen fünf Zehnerpotenzen, eine Reihe, die bei 1 mg/mL beginnt, endet also bei 0.00001 mg/mL und kann zwei Proben nicht trennen, die sich um weniger als den Faktor zehn unterscheiden. Den Faktor zu halbieren erkauft feinere Auflösung über denselben Bereich um den Preis von mehr Schritten: zehn Zweierschritte von 1 mg/mL erreichen ein Teil auf 1024, das sind 0.000977 mg/mL. Der Leitfaden zur Planung serieller Verdünnungen arbeitet dieselbe Wahl von der Planungsseite aus durch.

Das Transfervolumen setzt die Größe eines Schritts, nicht sein Verhältnis

Der Faktor wird durch das Verhältnis von Transfervolumen zu Gesamtvolumen des Schritts festgelegt, und das Transfervolumen legt nur den Maßstab fest, auf dem dieses Verhältnis gemessen wird. Mit einem Faktor von zehn und einem Transfer von 1 mL wird jeder Schritt gebildet, indem 9 mL Verdünnungsmittel hinzugefügt werden, um auf eine Summe von 10 mL zu kommen, das Verdünnungsmittel je Schritt ist also das Transfervolumen mal dem Faktor minus eins. Ändern Sie den Transfer auf 0.5 mL, wird das Verdünnungsmittel zu 4.5 mL, die Summe zu 5 mL, und der Faktor ist immer noch genau zehn. An der Konzentrationsreihe ändert sich überhaupt nichts.

Diese Unabhängigkeit ist es, die die Wahl des Transfers zu einer praktischen und nicht zu einer mathematischen Frage macht, und die praktische Einschränkung ist die Pipette. Ein Transfer, der klein ist im Verhältnis zum Nennvolumen des Geräts, wird von seinem eigenen Fehler beherrscht und nicht vom beabsichtigten Faktor, eine auf einem zu kleinen Transfer aufgebaute Reihe hat also einen Faktor, der nur dem Namen nach zehn ist. Mehr Volumen ist nicht automatisch besser: Ein größerer Transfer verbraucht in jedem Schritt mehr Verdünnungsmittel, und die beiden Wirkungen müssen gegeneinander abgewogen werden. Der Leitfaden zum Runden und zu kleinen Volumen behandelt die Fehlerseite dieses Kompromisses.

Jeder Schritt erbt die Mischung des Schritts davor

Die Reihe ist nur dann geometrisch, wenn jeder Schritt homogen ist, bevor aus ihm der nächste Transfer entnommen wird. Eine Lösung, die geschwenkt, aber nicht ordentlich gemischt wurde, hat keine einzelne Konzentration, und ein Transfer daraus nimmt eine Probe unbekannter Stärke, was aus einer systematischen Reihe eine zufällige macht, ohne dass etwas in der Ausgabe das anzeigt. Der Rechner kann das nicht erkennen, und kein späterer Schritt kann es auch, denn ein Fehler in Schritt zwei wird einfach zur Ausgangskonzentration von Schritt drei. Nichts weiter unten in der Kette kann ihn zurückholen, weshalb das Mischen zwischen den Schritten mehr Aufmerksamkeit verdient als der Transfer, den die Tabelle festhält.

Die Volumina hier werden als exakt behandelt, und das ist die zweite Idealisierung. Reale Transfers tragen ein paar Prozent Fehler, und weil die Schritte verkettet sind, summieren sich diese Fehler, statt sich herauszumitteln: nach fünf Schritten mit unabhängigen Fehlern nahe bei einem Prozent liegt die fertige Konzentration um ungefähr fünf Prozent daneben. Nichts davon ist durch Neuberechnen zu reparieren, weshalb die nützliche Gewohnheit ist, den Kopf der Reihe gegen etwas Bekanntes zu prüfen, bevor man dem Ende vertraut. Der Verdünnungsfaktor-Rechner ist ein schneller Weg, einen einzelnen Schritt der Kette für sich genommen zu bestätigen.

Wenn eine einzelne Verdünnung dieselbe Arbeit täte

Eine Kette von Schritten ist nicht automatisch das richtige Werkzeug, und es lohnt sich zu fragen, welches Problem tatsächlich gelöst wird. Ist eine Konzentration gewünscht, ist eine Verdünnung exakt, schneller und leichter zu prüfen, denn ein einzelnes Vielfaches enthält ein Verhältnis statt mehrerer. Der allgemeine Verdünnungsrechner erledigt das in einer Zeile. Eine Kette verdient ihren Platz, wenn aus einem Ausgangsmaterial ein Bereich von Konzentrationen gewünscht ist, oder wenn die Endkonzentration so klein ist, dass man sie direkt nur über einen Transfer erreichen würde, der zu klein zum genau Messen ist.

Wenn die Kette richtig ist, ist die nützliche Ausgabe die ganze Tabelle und nicht die letzte Zeile, denn die Zwischenschritte sind für sich genommen brauchbare Zubereitungen. Eine an einem Schritt hergestellte Arbeitslösung, die danach noch einmal verdünnt wird, ist eine getrennte Rechnung mit eigener Rundung, und der Rechner für Arbeitslösungen ist die Seite für diesen Schritt. Es lohnt sich außerdem zu bedenken, dass diese Seite eine Reihe plant und nicht eine bereits hergestellte beschreibt: Ob die Konzentrationen innerhalb des Bereichs liegen, den etwas tatsächlich messen kann, ist eine Frage der Messmethode und nicht eine der Rechnung.

Wie dieser Rechner funktioniert

In jedem Schritt wird die Konzentration durch den Faktor geteilt. Ist der Faktor zehn, ist die Reihe 10, 1, 0.1, 0.01, und jeder Schritt ist eine absteigende Zehnerpotenz.

In jedem Schritt entnehmen Sie ein Transfervolumen der vorherigen Lösung und fügen Verdünnungsmittel hinzu, um die Summe auf ein festes Volumen zu bringen. Das Transfervolumen setzt das Schrittvolumen, und das Verdünnungsmittel ist die Differenz. Nur der erste Schritt verwendet ein anderes Verdünnungsvolumen, weil der erste Schritt von der unverdünnten Stammlösung ausgeht.

Die Formeln

  • concentration at step i = initial concentration / factor^i

    i
    die Schrittnummer, beginnend bei 0 für die unverdünnte Stammlösung

    Eine geometrische Reihe. Jeder Schritt multipliziert mit demselben Faktor, eine Zehnerreihe überspannt also eine Zehnerpotenz je Schritt.

  • diluent volume at step i = total step volume - transfer volume

    In jedem Schritt gleich außer im ersten.

Durchgerechnetes Beispiel

Eine fünfstufige Zehnerreihe ab 1 mg/mL

Illustratives Beispiel. Die Zahlen sind so gewaehlt, dass die Rechnung leicht nachvollziehbar ist. Sie sind keine Dosis, kein Protokoll und keine Empfehlung.

Gegeben

Ausgangskonzentration
1 mg/mL
Verdünnungsfaktor
10
Anzahl der Schritte
5
Transfervolumen
1 mL
  1. Schritt 1
    Einsetzen
    1 / 10
    Ergebnis
    0.1 mg/mL
  2. Schritt 2
    Einsetzen
    0.1 / 10
    Ergebnis
    0.01 mg/mL
  3. Schritt 3
    Einsetzen
    0.01 / 10
    Ergebnis
    0.001 mg/mL
  4. Schritt 4
    Einsetzen
    0.001 / 10
    Ergebnis
    0.0001 mg/mL
  5. Schritt 5
    Einsetzen
    0.0001 / 10
    Ergebnis
    0.00001 mg/mL

Was das zeigt

Fünf Zehnerpotenzen Verdünnung, endend bei 0.00001 mg/mL. Eine Zehnerreihe ist im Bereich effizient, in der Auflösung aber grob, ein darauf ausgelegter Assay kann also nur Proben unterscheiden, die sich um den Faktor zehn unterscheiden. Den Faktor zu halbieren verdoppelt die Anzahl der Schritte für denselben Bereich.

Die Eingaben verstehen

Anfangskonzentration
Die Konzentration der unverdünnten Stammlösung, von der die Reihe ausgeht.
Verduennungsfaktor pro Schritt
Die Verdünnung um das Vielfache, die in jedem Schritt angewendet wird.
Aufpassen: Ein Faktor von 2 ist eine Verdünnung auf die Hälfte und halbiert die Konzentration, ein Faktor von 10 teilt durch zehn. Wo Sie 1:2 meinen, 2 zu schreiben, ist ein Fehler um den Faktor zwei in die andere Richtung.
Anzahl der Verduennungsschritte
Wie viele Verdünnungsschritte gefahren werden sollen.
Transfervolumen (mL)
Das Volumen, das aus jedem Schritt in den nächsten weitergetragen wird.
Aufpassen: Ein so kleines Transfervolumen, dass der Pipettierfehler dominiert, macht die ganze Reihe unzuverlässig. Pipetten sind am genauesten zwischen einem Zehntel und der Hälfte ihres Nennvolumens.

Die Ergebnisse verstehen

steps
Eine Zeile je Schritt, die die Schrittnummer, die resultierende Konzentration, das weitergetragene Transfervolumen und das hinzugefügte Volumen Verdünnungsmittel angibt.

Einheiten erklaert

Serial dilution
Eine Kette von Verdünnungen, von denen jede auf die vorherige angewendet wird.
Dilution factor
Das Vielfache, um das jeder Schritt die Konzentration senkt. Ein Faktor von 10 ist eine Verdünnung um den Faktor zehn.
Decade
Ein zehnfacher Bereich. Eine Zehnerreihe deckt je Schritt eine Zehnerpotenz ab.

Haeufige Fehler

  • Einen Faktor von 2 mit einer Verdünnung auf die Hälfte verwechseln. Es ist dasselbe, aber beide lassen sich leicht als das andere aufschreiben.
  • Ein Transfervolumen unterhalb des genauen Bereichs der verwendeten Pipette wählen, sodass der Schritt vom Pipettierfehler beherrscht wird und nicht vom beabsichtigten Faktor.
  • Zwischen den Schritten nicht mischen. Eine serielle Verdünnung ist nur geometrisch, wenn jeder Schritt vor dem Transfer gründlich gemischt ist.
  • Zu früh aufhören. Eine Zehnerreihe ab 1 mg/mL braucht elf Schritte, um unter 1 ng/mL zu kommen.

Wichtige Einschraenkungen

  • Das Transfervolumen wird als exakt behandelt. Reales Pipettieren trägt ein paar Prozent Fehler, und in einer langen Reihe summieren sich diese Fehler.
  • Das Modell nimmt perfekte Mischung und keine Übertragung zwischen den Schritten an.
  • Er plant die Reihe. Er weiß nicht, ob die Konzentrationen im Bereich liegen, den Ihr Assay messen kann.