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Peptide Calculator

Calcolatore della soluzione di lavoro

Risolve C1V1 = C2V2 per il volume di stock necessario, poi indica il volume di diluente che completa il volume finale. Per uso di laboratorio e ricerca; non un consiglio medico o di dosaggio.

Concentrazione e diluizione

Campi del calcolatore

Questo e uno strumento di riferimento matematico e di laboratorio. Non diagnostica, non tratta e non raccomanda una dose, e non costituisce un consiglio medico.

Il calcolatore della soluzione di lavoro prende una concentrazione madre e una concentrazione obiettivo, e restituisce quanto di soluzione madre prendere e quanto diluente aggiungere per raggiungere l’obiettivo in un dato volume finale.

È la seconda metà del flusso della soluzione madre, e il calcolo che nella pratica si usa più spesso, perché l’obiettivo di solito esiste in un metodo e la soluzione madre è ciò che c’è nel flacone.

È la stessa aritmetica C1V1 del calcolatore di diluizione generale, presentata come due volumi anziché come quattro concentrazioni.

Due volumi al posto di quattro concentrazioni

L’equazione generale di diluizione porta quattro termini perché deve funzionare in ogni direzione. Questa pagina ha bisogno soltanto di una di quelle direzioni, da una soluzione madre nota verso un obiettivo in un volume finale noto, quindi i quattro termini collassano in due numeri: il volume di soluzione madre da aggiungere e il volume di diluente che lo accompagna. Il volume di soluzione madre è la quantità di soluto che l’obiettivo richiede, cioè obiettivo per volume finale, divisa per ciò che ogni millilitro di soluzione madre contiene già. Tutto il resto di questa pagina è quella divisione e la sottrazione che la segue.

La forma generale vale comunque la pena tenerla aperta in una seconda finestra, perché è la versione che coglie un errore di unità. Quando la pagina a quattro termini restituisce un numero e questa ne restituisce un altro per la stessa preparazione, la differenza è quasi sempre un volume inserito come diluente quando il calcolo voleva un totale. Il calcolatore di diluizione C1V1 accetta anche tutti e quattro i valori come controllo di compatibilità, il che lo rende un controllo economico di un risultato già calcolato qui. Due pagine che rispondono alla stessa domanda in forme diverse sono una caratteristica di una pagina di riferimento e non un’incoerenza, purché entrambe siano giuste, e un disaccordo fra esse vale la pena investigarlo invece di mediare via.

Il volume di diluente è il posto in cui l’errore si nasconde

La sottrazione finale è abbastanza piccola da poter essere trattata come un pensiero dopo e abbastanza grande da contare. Una soluzione madre a 25 mg/mL portata a 5 mg/mL in un volume finale di 40 mL richiede 8 mL di soluzione madre e 32 mL di diluente. Se inserisci il volume finale come volume di diluente, che è l’errore di inserimento più comune su questa pagina, il volume finito diventa 48 mL. La soluzione sembra perfettamente limpida e perfettamente normale, e contiene 200 mg in 48 mL, che è 4.17 mg/mL e non 5.

La dimensione di quell’errore non è costante. È proporzionale al volume della soluzione madre, che a sua volta è proporzionale a quanto l’obiettivo è vicino alla soluzione madre. Quando l’obiettivo è un decimo della soluzione madre, il volume della soluzione madre è un decimo del totale e lo scarto è piccolo. Quando l’obiettivo è vicino alla soluzione madre, il volume della soluzione madre si avvicina all’intero volume finale e lo scarto si avvicina a dimezzare la concentrazione. Una soluzione madre a 10 mg/mL portata a 9 mg/mL in 100 mL richiede 90 mL di soluzione madre e 10 di diluente, e trattare il cento come il diluente dà 190 mL a circa 4.7 mg/mL, che è quasi fuori di un fattore due. Le cifre arrotondate producono lo stesso genere di problema, e la guida all’arrotondamento e ai piccoli volumi copre quel caso.

Perché una soluzione di lavoro si prepara per diluizione

Una soluzione di lavoro si prepara dalla soluzione madre e non dal solido perché questo sposta l’errore nell’unico posto in cui viene misurato una volta sola. Pesare per ogni preparazione paga l’errore di pesatura a ogni giro, nella direzione in cui la bilancia è casualmente derivata. Diluire lascia incerta soltanto la concentrazione della soluzione madre, e ogni preparazione eredita quella stessa incertezza nella stessa direzione. Il calcolatore della soluzione madre fissa quella singola grandezza incerta, ed è per questo che sta a monte di questa pagina in un flusso. Dove il solido è abbondante e la pesatura è facile, nulla di tutto questo si applica, e dissolvere il materiale direttamente all’obiettivo è del tutto ragionevole.

Lungo una catena di diluizioni gli errori si accumulano anziché mediarsi, perché ogni fattore è leggermente sbagliato a modo suo. Se tre diluizioni successive portano errori relativi dell’uno, del due e dell’uno per cento, l’errore relativo nella concentrazione finale è vicino alla loro somma, circa quattro per cento, e non alla loro media. È aritmetica e non un difetto del metodo, ed è l’argomento per confrontare una catena con una singola diluizione diretta ogni volta che entrambe sono possibili. Il calcolatore delle diluizioni seriali espone la catena quando serve davvero più di un passo.

Quando l’obiettivo sta sopra la soluzione madre

C’è una combinazione di ingressi che questa pagina rifiuta, e rifiutarla è corretto. Se la concentrazione obiettivo è più alta della concentrazione madre, nessun volume di diluente la raggiunge, perché aggiungere solvente può soltanto abbassare una concentrazione. Il volume di soluzione madre che la formula restituisce è maggiore del volume finale richiesto, il che richiederebbe un volume di diluente negativo, e un volume negativo non è una preparazione. Un diluente negativo è l’impronta aritmetica di una richiesta che non può essere soddisfatta dalla diluizione, il che rende il rifiuto informativo e non scomodo. La risposta onesta è una soluzione madre più concentrata, che è un calcolo diverso e una pagina diversa.

I casi vicini al confine valgono la pena essere conosciuti perché producono risultati che sembrano risposte. Un obiettivo uguale alla soluzione madre dà un volume di diluente pari a zero, che non è una diluizione ma un cambio di etichetta alla soluzione madre. Un obiettivo appena sotto la soluzione madre dà un piccolo volume di diluente e un grande volume di soluzione madre, che è il caso fragile descritto sopra. Quando l’obiettivo sta così vicino, dissolvere direttamente il materiale pesato all’obiettivo è di solito la strada più robusta. Dove la concentrazione deve venire da due soluzioni e non da una, il calcolatore di miscelazione delle soluzioni riporta esplicitamente entrambe le quantità.

Come funziona questo calcolatore

Il volume di soluzione madre necessario è la quantità di soluto richiesta divisa per la concentrazione madre. La quantità richiesta è la concentrazione obiettivo per il volume finale, quindi il volume di soluzione madre è l’obiettivo per il finale diviso per la concentrazione madre.

Il diluente è poi ciò che resta del volume finale, cioè il volume finale meno il volume della soluzione madre. Quella sottrazione è il passo più spesso mancato.

Le formule

  • stock volume = (target concentration x final volume) / stock concentration

    La quantità richiesta, divisa per ciò che è disponibile per mL.

  • diluent volume = final volume - stock volume

    Il resto. È questo che si preleva con la pipetta come diluente.

Esempio risolto

Preparare 50 mL a 10 mg/mL da una soluzione madre a 100 mg/mL

Esempio illustrativo. I numeri sono scelti per rendere l aritmetica facile da verificare. Non sono una dose, un protocollo o una raccomandazione.

Dati

Concentrazione madre
100 mg/mL
Concentrazione obiettivo
10 mg/mL
Volume finale
50 mL
  1. Calcola la quantità di soluto richiesta
    Sostituzione
    10 mg/mL x 50 mL
    Risultato
    500 mg
  2. Converti la quantità richiesta in un volume di soluzione madre
    Sostituzione
    500 mg / 100 mg/mL
    Risultato
    5 mL of stock
  3. Calcola il volume di diluente
    Sostituzione
    50 mL - 5 mL
    Risultato
    45 mL of diluent

Cosa dimostra

Cinque millilitri di soluzione madre e quarantacinque di diluente. Aggiungere invece tutti e cinquanta i millilitri di diluente darebbe una soluzione a 5 mg/mL, un errore di un fattore due, e uno che produce una soluzione che sembra ancora perfettamente limpida e normale.

Capire i valori inseriti

Concentrazione madre
La concentrazione della soluzione da cui stai prelevando, in mg/mL.
Attenzione: Se la soluzione madre è stata fatta ricostruendo un flacone, questa è la massa del flacone divisa per il volume che hai aggiunto, non la massa del flacone stessa.
Concentrazione target
La concentrazione che vuoi nella soluzione finita, in mg/mL.
Volume finale (mL)
Il volume totale che vuoi preparare, soluzione madre più diluente.
Attenzione: Inserire il volume di diluente che vuoi aggiungere. È un numero diverso, e confonderli è l’errore più comune con questo calcolatore.

Capire i risultati

Volume di soluzione madre da usare (mL)
Il volume di soluzione madre da prendere.
Volume di diluente da aggiungere (mL)
Il volume di diluente da aggiungere. Insieme al volume della soluzione madre dà il volume finale che hai inserito.

Unita spiegate

Diluent
Il solvente usato per portare la soluzione madre all’obiettivo. Nel lavoro sui peptidi l’acqua batteriostatica è il caso tipico, e non è scambiabile con nessun altro diluente senza verificarne la compatibilità.

Errori comuni

  • Trattare il volume finale come volume di diluente. I due differiscono del volume della soluzione madre, e l’errore è proporzionale.
  • Inserire una concentrazione obiettivo superiore alla concentrazione madre. Non si può raggiungere per diluizione; va preparata invece una soluzione madre più concentrata.
  • Ignorare che il diluente stesso può avere volume e soluto. Acqua in acqua va bene, ed è per questo che questo calcolo è sicuro per le diluizioni acquose e non per tutte.

Limitazioni importanti

  • Suppone volumi additivi e miscelazione completa.
  • È un calcolo di pianificazione. Non sa se la concentrazione sia realizzabile, se il materiale sia disponibile o se il diluente sia compatibile.

Domande frequenti

What does the working solution calculator compute?

Given a stock concentration, a target, working, concentration, and a final volume, it computes how much stock solution and how much diluent to combine, using C1V1 = C2V2 solved for stock volume.

How do I use the working solution calculator?

Enter your stock concentration, your target working concentration, and the final volume you want to prepare. The calculator returns the stock volume to use and the diluent volume to add.

What is the formula the working solution calculator uses?

Stock volume equals target concentration times final volume, divided by stock concentration; diluent volume is whatever remains of the final volume after the stock volume is accounted for.

What happens if my target concentration is higher than my stock concentration on the working solution calculator?

The calculator rejects this input, since you cannot dilute a stock up to a higher concentration than it already has; the target concentration must be at or below the stock concentration.

What units does the working solution calculator use?

Stock and target concentration can be in any consistent unit, they just need to match each other; final volume, stock volume and diluent volume are all in mL.

How is the working solution calculator different from the buffer dilution calculator?

They use the exact same underlying math; the buffer dilution calculator is simply framed around buffer x-strength units, like diluting 10x PBS to 1x, rather than mass concentration units.

What if stock and target concentration are equal on the working solution calculator?

The calculator returns a stock volume equal to the full final volume and a diluent volume of zero, correctly reflecting that no dilution is needed.

Is the working solution calculator free to use?

Yes. The working solution calculator runs entirely in your browser.