आइसोइलेक्ट्रिक पॉइंट (pI) वह pH मान है जिस पर पेप्टाइड का कुल नेट इलेक्ट्रिक चार्ज शून्य होता है। यह कोई रटा-रटाया स्थिरांक नहीं बल्कि एक रासायनिक समीकरण का हल है।
नेट चार्ज: आयनित होने वाले समूहों का योग
दिए गए pH पर कुल चार्ज सभी आयनित समूहों के चार्ज का योग होता है: मुक्त N-टर्मिनल अमीन, मुक्त C-टर्मिनल कार्बोक्सिल और साइड चेन (Asp, Glu, Cys, Tyr, His, Lys, Arg)।
प्रत्येक समूह का योगदान हेंडरसन-हैसेलबैक संबंध पर निर्भर करता है। नेट चार्ज कैलकुलेटर इस योग की गणना करता है।
pI: जहाँ चार्ज शून्य होता है
pH बढ़ने पर नेट चार्ज घटता है। बहुत कम pH पर सभी समूह प्रोटॉनेटेड होते हैं (अधिकतम धनात्मक चार्ज); उच्च pH पर डीप्रोटॉनेटेड होते हैं (अधिकतम ऋणात्मक चार्ज)। जहाँ यह वक्र शून्य को काटता है, वही pI है।
आइसोइलेक्ट्रिक पॉइंट की गणना कैसे होती है?
आइसोइलेक्ट्रिक पॉइंट कैलकुलेटर pH 0 से 14 के बीच बाईसेक्शन विधि का उपयोग करके 1e-6 की सटीकता से pI खोजता है।
ब्जेलक्विस्ट pKa पैमाना
सभी pKa मान ब्जेलक्विस्ट एवं अन्य (1993, 1994) के प्रकाशित पैमाने पर आधारित हैं, जो ExPASy Compute pI/Mw टूल का मानक है।
चार्ज वक्र और चार्ज्ड अवशेष प्रतिशत
चार्ज बनाम pH कर्व कैलकुलेटर संपूर्ण वक्र प्रदर्शित करता है, और चार्ज्ड अवशेष अंश कैलकुलेटर आयनित होने वाले अवशेषों का प्रतिशत बताता है।
संक्षेप में
संक्षेप में: आइसोइलेक्ट्रिक पॉइंट वह pH है जहाँ किसी पेप्टाइड के सभी चार्ज योगदानों का योग शून्य होता है, जिसे बाईसेक्शन विधि से ब्जेलक्विस्ट pKa पैमाने पर संख्यात्मक रूप से खोजा जाता है।
वैज्ञानिक साहित्य और संदर्भ
- Bjellqvist, B., Hughes, G. J., et al. (1993). The focusing positions of polypeptides in immobilized pH gradients. Electrophoresis, 14(1), 1023-1031. PubMed PMID: 8125050. पॉलीपेप्टाइड pKa पैमाना।
- Bjellqvist, B., Basse, B., et al. (1994). Reference points for comparisons of two-dimensional maps. Electrophoresis, 15(1), 529-539. PubMed PMID: 8055880. 2D जेल हेतु pKa अंशांकन।
- Nelson, D. L., & Cox, M. M. (2021). Lehninger Principles of Biochemistry (8th ed.). W. H. Freeman. अध्याय 3: अमीनो एसिड और पेप्टाइड।
- Gasteiger, E., et al. (2005). Protein Identification and Analysis Tools on the ExPASy Server. The Proteomics Protocols Handbook, Humana Press, 571-607.